之前我們略述了代謝組學的課題設計，按照設計的思路進行實驗后，就需要進行代謝樣本的收集了。今天咱按照不同類型的樣本，給大家提供一點收集的建議。
一、針對細胞類型樣本，可分為四類如下：
1、貼壁細胞
2、懸浮細胞
3、微生物
4、 胞外代謝(xie)產物
四類細胞樣本處理方法如下：
1、貼壁細胞
去除培(pei)養基，采用預冷的 PBS 清洗 2 - 3 次(ci)，離心(xin)棄去上清，加入 1ml 60% 冷甲(jia)醇，把培(pei)養容器中的所有細胞都(dou)刮取干凈(jing)，收(shou)集在 1.5ml 離心(xin)管(guan)中，液氮速凍后 -80°C 保存(cun)。
2、懸浮細胞
離(li)(li)(li)心收集懸浮細胞，用(yong)預冷的 PBS 清洗 2 - 3 次(ci)，離(li)(li)(li)心棄上清，收集細胞于(yu) 1.5ml 離(li)(li)(li)心管中，液氮速(su)凍后 -80°C 保存。
3、微生物
取生(sheng)(sheng)長對數后(hou)期的(de)或(huo)者穩定期中(zhong)段的(de)微生(sheng)(sheng)物，低溫(wen)離心（4°C, 12000rpm, 10min），沉淀微生(sheng)(sheng)物，去掉上清液，放入液氮中(zhong)或(huo) -80°C 保存。
4、胞外代謝產物
培養基上清收集(ji)后(hou)液(ye)氮淬滅，凍干處理后(hou) -80℃保存。
二、針對植物樣本可按部位分為根、莖葉、果實及培養液等，其樣本處理方法如下：
1、根
取植物的根部 50mg 以上，用 PBS 漂洗掉根上的泥土后用吸水紙吸掉多余水分，裝入離心管，立即用液氮速凍處理 15min，于 -80°C 下保存。
2、莖、葉、花等
參(can)照實驗設計取特定組織部位(wei) 50mg 以上。用(yong)錫箔紙包裹并標記后，立即用(yong)液氮速凍(dong)處理(li) 15min，于 -80°C 下保(bao)存(cun)。
3、果實
將同(tong)組的植株種(zhong)子(zi)混勻后分裝 50mg 以(yi)上至凍存(cun)管(guan)中，立即用(yong)液(ye)氮速(su)凍處理 15min，于 -80°C 下保存(cun)。（如果果實外殼較硬，需要用(yong)粉碎(sui)機(ji)打碎(sui)過篩(shai)。）
4、植物培養液
直(zhi)接低溫(wen)離心(xin)（4°C, 12000rpm, 10min），取(qu)上清(qing)液(ye)，移至 1.5mL 離心(xin)管，200μL 分(fen)裝后(hou)，于 -80°C 下(xia)保存。
三、針對臨床和動物類型樣本，其樣本處理方法如下：
主要可分為體液（血清、血漿、尿液、淚液、腦脊液等）和組織類型（肝臟、腫瘤、肌肉、糞便等）等，處理方法如下：
1、血清
血液(ye)收(shou)集在不含抗凝劑的(de)離(li)心(xin)管(guan)(guan)中(zhong) 4°C（或冰浴）靜置 1h 進行凝固分層，低溫離(li)心(xin)（4°C, 12000rpm, 10min），取(qu)上清(qing)轉移(yi)至干(gan)凈的(de)離(li)心(xin)管(guan)(guan)中(zhong)。取(qu)上清(qing)分裝到 1.5mL 離(li)心(xin)管(guan)(guan)中(zhong)，每管(guan)(guan) 0.2mL，于 -80°C 下(xia)保存。
2、血漿
使(shi)用(yong)肝素鈉抗凝(ning)管采集全血，輕(qing)輕(qing)搖晃(huang)采血管（避免紅細胞破(po)裂）使(shi)抗凝(ning)劑和血液充分(fen)混(hun)合，低溫離心（4°C, 12000rpm, 10min），取(qu)上清液分(fen)裝(zhuang)到 1.5mL 離心管中，每(mei)管 0.2mL，于 -80°C 下保存。
3、尿液
取(qu)稱取(qu)中(zhong)(zhong)段尿(niao)到離心管中(zhong)(zhong)，低溫離心（4°C, 12000rpm, 10min），吸取(qu)澄清尿(niao)液(ye)分裝到 1.5mL 離心管中(zhong)(zhong)，每(mei)管 0.2mL，于 -80°C 下保存(cun)。
5、組織（肝臟、腫瘤、肌肉等）
根(gen)據實驗設計取特定組織部位，如果組織上(shang)有血液殘留，用(yong)生理鹽水將(jiang)其漂洗掉，按照 100 mg/ 樣本裝入凍存(cun)管中；后(hou)立(li)即用(yong)液氮速凍處理 15min，于 -80°C 下保(bao)存(cun)。
以上是主要常見的幾種樣本類型采集方式啦，不過生物樣本類型多樣，童鞋們有其他類型的樣本不確定如何收集可與我們直接溝通~
微信鏈接
更多伯豪生物服務
